（D）（C））uay（（B）ay（ay（72220912ec ZcaL-KEHecnabrosbadezecnabrosbAiltisnei SRSecnabrosbadez）uay（ecnabrosbAtisnenili SRS（F））u02000（E））u1−mc 1−mc tisneni tisneni llSRSSRSβ-galactosidase（A）+NーO+NOOCNCXOOCNCX..tn..t 840 84000s..t5..tamroN02000amroN0200002000（A）9CN-JR-Bn-βGalおよび9C15N-JCR-Bn-βGalの酵素反応式。（B, C）β-Gal添加前後での吸収スペクトル（B）およびSRSスペクトル（C）の変化、上段：9CN-JR-Bn-βGal、下段：9C15N-JCR-Bn-βGal。（D）濃度に対する吸光度の推移による凝集性評価、上段：9CN-JR-Bn-βGalと9CN-JR、下段：9C15N-JCR-Bn-βGalと9CN-JCR。（E）9CN-JR-Bn-βGalと9C15N-JCR-Bn-βGalで同時に処理したHEK-LacZ細胞のSRS画像、スケールバー：10μm。（F）（E）におけるSRSスペクトル、左：視野全体、右：凝集体部分。3． 9CN-rhodolプローブ母核の最適化15N15N凝集性：低Enzyme （−）Enzyme （＋）2001601208040210022002300Wavenumber（cm−1）Enzyme （−）Enzyme （＋）10080604020210022002300Wavenumber（cm−1）30252015102100Wavenumber（cm−1）凝集性：高X = O: 9CN-JR-Bn-βGal, CMe2 : 9C15N-JCR-Bn-βGal0.070.060.050.040.030.020.010400Enzyme （−）Enzyme （＋）500700Wavelength（nm） 0.070.060.050.040.030.020.010400Enzyme （−）Enzyme （＋）500700Wavelength（nm） 9C15N-JCR-Bn-βGalHOHOHO6008006008009CN-JR-Bn-βGalOHSRS信号：OFFX = O: 9CN-JR, CMe2 : 9C15N-JCR20161220Concentration（μM）20161220Concentration（μM）40030020010022002300SRS信号：ON9CN-JR-Bn-βGal9CN-JR4060801009C15N-JCR-Bn-βGal9CN-JCR406080100210022002300Wavenumber（cm−1）22図2 9CN-rhodolプローブ母核の最適化 第2項での検討から9CN-rhodolが凝集性プローブの母核として優れた性質を有していることが示唆されたため、9CN-rhodolの誘導体展開を行うことで最適なプローブ母核の探索を行った。その結果、凝集性に優れた9CN-JRと明るさに優れた9CN-JCRがプローブ母核として有望であることが示唆されたため、これらを母核 としたプローブを開発して、細胞イメージングによって その最終的な優劣を判断することとした。そこで、β- galactosidase（β-Gal）を標的としたβ-Gal検出プローブ9CN-JR-Bn-βGalと9C15N-JCR-Bn-βGalを開発した（図2A）。開発したプローブはいずれも標的酵素であるβ-Galの添加によって吸収波長が長波長化し、SRS信号
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