183図3 NCC-149（1）類縁体のHDAC阻害活性評価NCC-169（6）NCC-170（7）NCC-171（8）NCC-172（2）IC50（μM）HDAC2＞100＞100＞100＞100＞100＞100HDAC80.0701.40.150.120.0530.22NCC-173（9）compoundsNCC-149（1）NCC-169（6）NCC-170（7）NCC-171（8）NCC-172（2）NCC-173（9）HDACs54＞100＞100＞100＞100＞100HDAC138＞100＞100＞100＞100＞100HDAC444＞100＞10040＞100＞100HDAC62.431147.82.27.2容易に構築できると考えた（図2B）。実際に、筆者らは、1次スクリーニングにおいて、15種類のCapアジドと 8種類のZBGアルキンを用いて、120化合物からなるライブラリーを、2次スクリーニングでは、1次スクリーニングの結果を基に1種類のZBGアルキンを選択し、31種類のCapアジドを用いた31化合物からなるライブラリーを構築した。なお、CapアジドとZBGアルキンは、マイクロウェルプレート上でDMSO溶液中、触媒量のCuSO4、アスコルビン酸ナトリウム、tris［（1-benzyl-1H-1,2,3-triazol-4-yl）methyl］amine（TBTA）存在下、24～72時間反応させ、TLCおよびLC-MSにて出発物質の消失とトリアゾールの生成を確認した。 クリックケミストリーを用いて構築したライブラリーに対して、化合物を単離・精製することなくHDAC8阻害活性評価を行い、スクリーニングした。なお、系中に残存するCu（I）やアスコルビン酸、TBTAは、HDAC8阻害活性評価に影響を与えないことを確認している。スクリーニングの結果、NCC-142（5）とNCC-149（1）が高いHDAC8阻害活性を有していることが示唆された。そこで、NCC-142（5）およびNCC-149（1）を再合成、精製し、HDAC1、HDAC2、HDAC4、HDAC6、HDAC8およびさまざまなHDACアイソフォームを含むHeLa細胞の核抽出液に対する阻害作用を評価した（図2C）。その結果、NCC-142（5）およびNCC-149（1）は、既存のHDAC8阻害薬PCI-34051よりも強力なHDAC8阻害活性を示した。さらに、vorinostat（4）がHDAC8よりもHDAC1、HDAC2、およびHDAC6を強く阻害したのに対し、NCC-142（5）およびNCC-149（1）は、他のアイソザイムよりもHDAC8を選択的に阻害することがわかった。このように筆者らは、高活性かつ選択的なHDAC8阻害薬としてNCC-142（5）およびNCC-149（1） を見出した。3. NCC-149（1）の構造最適化による NCC-172（2）の創製 上述したクリックケミストリーによるライブラリー構築法では、その性質上トリアゾール化合物しか評価できない。そこで、最も活性の高かったNCC-149（1）のトリアゾールリンカー部位の構造最適化を行った。NCC-149（1）のトリアゾール環をさまざまな芳香環に変換したNCC-169（6）、NCC-170（7）、NCC-171（8）、NCC-172（2）およびNCC-173（9）を設計、合成した（図3）。合成した化合物について、HDAC1、HDAC2、HDAC4、HDAC6、HDAC8に対する阻害活性を調べた（図3）。NCC-149（1）のトリアゾール環をフェニル環に置換した化合物NCC-169（6）は、HDAC8選択性を示すものの、その阻害活性はNCC-149（1）に比べ約20倍低かった。一方、NCC-170（7）、NCC-171（8）、NCC-172（2）およびNCC-173（9）はHDAC8を強く阻害した。中でも、NCC-172（2）は、NCC-149（1）よりも優れたHDAC8阻害活性・選択性を示した。これらの結果は、五員環ヘ
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