72Figure 2 デコイ核酸型PROTACの分子デザインFigure 3 （A）各PROTACのERα分解活性、（B）リンカー構造の最適化LCL-ER（dec）が最も高い分解活性を示した（Figure 3A）。またLCL-ER（dec）は、転写因子を含む他のタンパク質（AR、AhR、p65、BRD4、p300、GAPDH、CRABP2、β-actin）を分解していなかったことから、ERαを選択的に分解することが明らかとなった。 次いで、LCL-ER（dec）の最適なリンカー長を検討するため、新たにPEG2リンカー体（LCL-ER（dec）-P2）、PEG4リンカー体（LCL-ER（dec）-P4）を合成し、ERα結合活性および分解活性をそれぞれ評価した。LCL-ER（dec）-P2、LCL-ER（dec）-P4は、IC50＝30－50nMでERαに結合し、リンカー長の変化による顕著な結合活性の差は見られなかった。一方で、ERα分解活性では、PEG3リンカー体のLCL-ER（dec）が最も高い活性を示した（Figure 3B）。4. LCL-ER（dec）のERα分解メカニズム解析 最も高い分解活性を示したLCL-ER（dec）について、E3リガーゼ依存性評価、結合配列依存性評価、UPS依存性評価によりERα分解メカニズム解析を行った（Figure 4）。（A） E3リガーゼ依存性を評価するため、IAPへの結合活性を欠失させたNMeLCL-ER（dec）を設計・合成し、ウェスタンブロッティングにより評価した。その結果、NMeLCL-ER（dec）はERαを分解しなかったことから、LCL-ER（dec）はE3リガーゼであるIAP依存的にERαを分解していることが示唆された（Figure 4A）。（B） ERα結合配列の依存性を評価するため、3種類のscramble配列（LCL-Scrabl1-3）を設計・合成し た。LCL-Scrabl1-3はいずれもERαに結合せず （＞3μM）、また、ERα分解活性を示さないことが
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