2． バイオ技術の蓄積を礎とした独自基盤技術82-1．CHO細胞高発現技術（J-MIG System®） CHO細胞（チャイニーズハムスター卵巣由来細胞）を用いたバイオ医薬品生産において発現量の向上は大きな課題であるが、この課題克服のために確立されたのがCHO細胞高発現ベクターシステムJ-MIGSystem®である。このベクターシステムでは、発現させたい目的遺伝子とチャイニーズハムスター由来グルタミン合成酵素遺伝子（GS）を、改変型リボソーム挿入部位（modified-IRES）を介して連結することで目的遺伝子の発現を担保しつつ、第2シストロンに位置するGSの発現レベルをより低く抑えることで、培地に添加したGS阻害剤メチオニンスルホキシミン（MSX）による選択圧を高めている。さらに、本ベクターにはピューロマイシン耐性遺伝子発現ユニットも搭載されており、染色体に挿入された遺伝子発現ユニットが内因性GS遺伝子より優位に増幅されるように考えられている。J-MIGSystem®は、JR-142（持続型成長ホルモン）などの生産株構築に使用されている。2-2．糖鎖修飾制御技術（J-GlycoS®・J-GlycoM®） CHO細胞を宿主として生産するバイオ医薬品の多くは糖タンパク質であり、糖鎖構造の違いはその安全性と有効性に大きな影響を及ぼす。特に糖鎖末端に修飾されるシアル酸は、血中薬物動態に非常に大きな影響を及ぼすため非常に重要である。当社がバイオ後続品として製造販売しているエリスロポエチンBSおよびダルベポエチンBSの研究開発では、先行品と同レベルの高いシアル酸修飾率が求められた。特にダルベポエチンに関しては、ChemicallyDefinedMedia（組成がすべて化学的に明らかな合成培地）での生産培養を目指したため、非常に高い難易度となった。この課題を克服するために採用されたのがシアル酸修飾強化技術J-GlycoS®である。もともと、J-GlycoS®は卵胞刺激ホルモン（FSH）の生産のために確立された技術で、適切な濃度のウリジンとN-アセチルマンノサミンを添加することで、シアル酸 当社の基盤技術は、バイオ医薬品を開発するうえで露見してきた技術的課題を克服するために確立されたものが多く、新たに生み出した技術は実際の医薬品開発に大きく寄与している。今回はそのいくつかを紹介する。2-3．血中半減期延長技術 単純タンパク質の血清アルブミン（HSA）は血漿中で最も量が多く、非常に長い血中滞留性を示すため、タンパク質製剤の持続化戦略としてHSAとの融合化が数多く取り組まれてきている。当社は、より優れた血中滞留性を示すHSAとして、ドメイン2領域にN型糖鎖を1ヵ所修飾した改変型HSAを新たに創製した。ヒト成長ホルモン（hGH）のC末端側にこの改変型HSAを融合させたJR-142は、非常に長い血中滞留性と持続的な活性を示し、週1回の皮下投与でhGHの連日投与と同等の薬効を示すことが確認されている。現在、持続型の成長ホルモン製剤として臨床試験を行っている。2-4．血液脳関門通過技術（J-Brain Cargo®） 脳は、他の組織や臓器に比べて種々のストレスに弱く、有害物質や不必要な物質が脳内に入らないようにバリアー機構として血液脳関門（BBB）が備わっているが、この機構は中枢性疾患を対象とした創薬の大きな障壁となっている。当社は、抗トランスフェリン受容体（TfR）抗体を基盤としたBBB通過技術J-BrainCargo®の開発に成功している。本技術を適用した薬剤は、TfRを介したトランスサイトーシスによりBBBを通過して、脳実質組織に到達することができる。当社は、ライソゾーム病の1種であるハンター症候群（ムコ多糖症Ⅱ型）の原修飾につながる糖ヌクレオチド生合成経路を強化し、高度にシアル酸が修飾されたFSHを発現させることができる。当社は、ダルベポエチンBSに本技術を適用することで高度なシアル酸付加に成功している。 糖鎖は薬剤のドラッグデリバリーシステム（DDS）にも応用できる。高マンノース型糖鎖は、マンノースレセプターを高発現しているマクロファージやクッパー細胞などの網内系組織へのデリバリーに特に有用である。実際、臨床で使われているゴーシェ病治療用酵素セレザイム（GBA：β-グルコセレブロシダーゼ）は、糖鎖をグリコシダーゼでトリミングすることでマンノース型糖鎖に変換している。当社で確立されたマンノース型糖鎖修飾技術J-GlycoM®は、目的遺伝子を発現しているCHO細胞に夜盗蛾やショウジョウバエなどの昆虫由来β-N-acetylglucosaminidase遺伝子を共発現させることで、すべてのN型糖鎖をマンノース型に変換することができる。本システムを適用して生産したGBAは、網内系細胞への高い移行性を示すことを確認している。の開発
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